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永盈会体育投注:帕金森病，这个以“手抖、僵硬、行动迟缓”为特征的神经退行性疾。跋熳湃蚴偻蛉说慕】。然而，我们对其发病机制和潜在治疗手段的探索，很大程度上依赖于一个关键工具——动物模型。

? 信息卡（速览）

• 推荐品系：C57BL/6J（对 MPTP/PFF 最敏感、资料最全）。

• 性别与年龄：雄性 8–12 周表型更稳；雌性可用但 MPTP 反应偏弱（雌激素保护）。

• 实验环境：温湿度恒定、昼夜节律固定；MPTP 会致低体温，必要时加温板。

  
  

永盈会体育投注:? 两套常用的小鼠 PD 模型 SOP

下述为主流文献范围与新手友好剂量，不同批次/体重/载剂差异显著；务必先做小样试验并遵守伦理与化学/生物安全。

SOP 1｜MPTP 系统注射模型（常用）

原理：MPTP 过 BBB → 星形胶质 MAO-B 代谢为 MPP+ → 通过 DAT 进入 DA 神经元并阻断复合体 I，黑质-纹状体轴选择性损伤。
适用：药效学、线粒体/氧化应激、炎症-神经胶质研究；运动缺陷 3–7 d 出现，2–4 周稳定。

对象：C57BL/6J 雄性 8–12 周。
配制与安全：MPTP-HCl 溶于无菌生理盐水（现配现用，避光），双层手套+一次性罩衣+生物安全柜操作；污染面用次氯酸或漂白粉溶液处理。

给药方案（任选其一）

• 急性 1 日法（经典）：20 mg/kg i.p. × 4 次，每次间隔 2 h；行为缺陷明显、损伤集中。

• 亚急性 5 日法：30 mg/kg i.p. × 1 次/日，连 5 天；损伤均匀、死亡率低。

• 慢性低剂量：10–15 mg/kg i.p. × 3–5 次/周，连 4–5 周；更接近缓进型，炎症读数好。

  
  

下述为主流文献范围与新手友好剂量，不同批次/体重/载剂差异显著；务必先做小样试验并遵守伦理与化学/生物安全。

SOP 3｜α-突触核蛋白 PFF 接种（聚集与病理传播）

原理：体外聚集的 α-syn 纤维（PFF）在脑内“播种”，诱导pSer129-α-syn 病理沿神经网络传播，随后迟发性 DA 神经元丢失。
适用：蛋白聚集/传播、炎症-胶质反应、长期药效。

关键材料与质控

• 重组小鼠/人 α-syn 体外聚集制得 PFF，TEM/ThT质控纤维形态与荧光；超声至短片段（50–150 nm）。

时间线与读数

• 1–2 月：pSer129-α-syn 病理在纹状体/皮层/黑质出现；轻度行为改变。

• 3–6 月：SNpc TH+ 细胞丢失 30–50%，运动表型稳定；炎症读数（Iba1/GFAP）上升。

• 兼做：溶酶体-自噬、线粒体、突触蛋白改变；消化道/嗅球播散可作为“肠-脑轴/嗅球起源”变体。

避坑要点

• PFF 质量即生命线：每批做 TEM/ThT；冻融次数≤1；操作Biosafety 2。

• 进针/回流控制同 6-OHDA；对侧 PBS或热变性 PFF为阴性对照。

  
  

SOP 4｜AAV-SNCA 过表达（慢性细胞自主毒性）

原理：AAV（2/5、2/6、9 等）介导 SNCA（野生型或 A53T）在黑质 DA 神经元过表达→α-syn 聚集/应激/迟发性死亡。
适用：基因-药物干预、时序可控、表达剂量可调。

要点

• 载体与启动子：TH/PRSx8/EF1α 等，滴度 ≥1×10?? vg/mL；注射 1–2 ?L/侧。

• 时间线：4–8 周出现轻中度行为缺陷；8–12 周 TH 下降与 pSer129-α-syn 上升；炎症与突触改变同步。

• 验证：qPCR/Western（SNCA）、TH 免疫、pSer129-α-syn、Iba1/GFAP；行为同上。

避坑要点

• 表达剂量窗口要先摸索（过低无效，过高致炎症性坏死）；

• 病毒操作 BSL-2；对照用 AAV-GFP 或空载体。

  
  

? 典型时间线（整合版）

• MPTP（亚急性）：Day 1–5 注射 → Day 7 行为 → Week 2 TH/HPLC。

• 6-OHDA（纹状体）：术后 Week 2–3 行为 → Week 3–4 取材。

• PFF：术后 Month 1–2 病理出现 → Month 3–6 TH↓ + 行为。

• AAV-SNCA：Week 4–8 行为 → Week 8–12 病理/TH↓。

  
  

???? 伦理与安全（必须遵守）

• IACUC/等同伦理审批；最小动物数量与人道终止标准（体重↓>15%、行动不能、体温过低）。

• 化学品安全：MPTP/6-OHDA 设专门操作区，废液与垫料按危化/医疗废物处理。

• 生物安全：PFF/AAV 均按 BSL-2；锐器/污染物分类高压或化学灭活。

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